Seguridad en el Laboratorio Químico

Factores de Riesgo Frecuentes:

• Reactivos y solventes con diversa toxicidad.
• Equipos eléctricos.
• Material de vidrio.

En los planes de control de accidentes y emergencias, debemos estudiar los aspectos que involucran nuestra actuación tanto en la prevención como en la reacción y respuesta frente a un accidente químico.

Accidente Químico

Acontecimiento o situación peligrosa que resulta de la liberación de una o más sustancias químicas que representan un riesgo para la salud humana o el ambiente, a corto o largo plazo.

Riesgos y Consecuencias de un Accidente Químico

Incluyen: incendios, explosiones, fugas o liberación de sustancias tóxicas. Pueden provocar: enfermedad, lesión, invalidez o muerte.

Clasificación de los Accidentes Químicos

• Según la sustancia química.
• Según la fuente de liberación.
• Según la extensión del área contaminada.
• Según el número de personas expuestas.
• Según las consecuencias para la salud.

Toxicología

Es la ciencia que estudia los efectos nocivos producidos por las sustancias químicas sobre los organismos vivos. Son múltiples las áreas involucradas en el estudio de la toxicología, pero nuestro interés se centra en los aspectos relacionados en el laboratorio de química, es decir, (toxicología ocupacional).

Sustancia Peligrosa

Es un agente o sustancia peligrosa que tiene la capacidad de causar daño en un organismo expuesto.

Toxicidad

Capacidad de producir un efecto adverso o nocivo sobre un organismo vivo en contacto con una sustancia química. Toda sustancia es tóxica; la dosis es lo que hace la diferencia entre una sustancia tóxica y un medicamento.

Índice Toxicológico DL50 (Dosis Letal 50)

Medida del nivel de toxicidad de un producto químico. Corresponde a la dosis de una sustancia química necesaria para causar la muerte en el 50% de los animales en experimentación. Es un parámetro que se deduce luego de realizar pruebas con el agente tóxico sobre animales.

Dosis Letal Probable para Humanos

Cuanto más pequeño es el valor del DL50, más tóxico es el producto.

Toxicidad según Dosis (mg/kg de peso)

1. Prácticamente no tóxica: > 15.000
2. Ligeramente tóxica: 5.000-15.000
3. Moderadamente tóxica: 500-5.000
4. Muy tóxica: 50-500
5. Extremadamente tóxica: 5-50
6. Súper tóxica: < 5

Índice Toxicológico MAK

Es la concentración máxima permisible de un producto peligroso como gas, vapor o partícula flotante en el aire, en el lugar de trabajo en exposición repetida y duradera, manteniendo un tiempo promedio de trabajo de 40 horas a la semana, que no cause daños a la salud del operador. Se relaciona directamente al ambiente de trabajo y su incidencia tóxica sobre las personas. De igual manera que el DL50, cuanto menor sea el valor MAK, más tóxico es el producto.

Exposición

Es una medida del contacto entre el agente químico y el organismo, y es función de la concentración y del tiempo.

Categorías de Toxicidad

• Sustancias que son absorbidas al exponerse a ellas, pero una vez eliminada la fuente, son reducidas naturalmente.
• Sustancias que ocasionan un efecto acumulativo y que no son fáciles de eliminar.

Exposición de Corta Duración

Una o varias exposiciones, en un período de 24 horas o menos; el agente químico es rápidamente absorbido produciendo intoxicación.

Exposición a Largo Plazo

Se produce por cantidades pequeñas, durante períodos largos; los efectos pueden aparecer de inmediato, después de cada exposición o producir efectos crónicos. Los diversos agentes tóxicos pueden ser transportados hacia nuestro organismo por aire, agua, alimentos, medicamentos.

Absorción

La absorción implica que la sustancia química atraviesa membranas biológicas.

Vías de Entrada al Organismo

• La inhalación de gases, vapores o aerosoles.
• Absorción por la piel debido al contacto con el agente tóxico.
• Ingesta accidental, por ejemplo, uso de pipetas sin propipetas.

Clasificación de las Sustancias Químicas según el Efecto Nocivo

• Irritante
• Asfixiante
• Anestésica
• Sustancias que dañan el pulmón

Factores que Determinan el Efecto Tóxico

• Condiciones de exposición: vía, dosis, frecuencia.
• Factores biológicos: absorción, distribución, biotransformación, edad, sexo, peso, estado de salud.
• Ambiente: temperatura, humedad, hora del día, estrés.

Intoxicación Crónica

Se caracteriza por exposiciones repetidas durante largos períodos de tiempo. Los efectos se manifiestan porque:

• El agente tóxico se acumula en el organismo, es decir, la cantidad absorbida es mayor que la eliminada.
• Los efectos producidos por las exposiciones repetidas se suman sin acumulación del agente tóxico.

Intoxicación Aguda

Se caracteriza por exposiciones de corta duración, absorción rápida del agente químico, una dosis única o varias dosis, en un período no mayor de 24 horas. Los efectos aparecen en general rápidamente, y la muerte o la cura son el resultado inmediato.

Efectos Nocivos

• Sistema respiratorio: daño en las células del tracto respiratorio, enfisema, irritación pulmonar y de las vías aéreas, constricción de los bronquios, alergias.
• Tracto gastrointestinal.
• Piel: enrojecimiento, hinchazón, picazón, alergia.
• Hígado: necrosis, colestasis.
• Riñón: alteración de la función renal.
• Sistema nervioso: falta de oxígeno en el cerebro, pérdida de mielina (hexaclorobenceno).
• Sistema reproductivo: reducción de la fertilidad.
• Carcinogénico: tumor maligno, cáncer.

El objeto de conocer los posibles riesgos del trabajo en el laboratorio químico, demuestra nuestro interés por crear un ambiente seguro de trabajo, de tal manera que nuestra conciencia de riesgo se vuelque en rigurosidad en el seguimiento de los procedimientos en cada experiencia del laboratorio para lograr con éxito los objetivos de dichas prácticas y evitar cualquier tipo de accidente.

Clasificación e Identificación de los Materiales Peligrosos

Clasificación de Peligro

Existen dos tipos de clasificación de peligro. En Chile se usan indistintamente las dos. Un tipo se refiere al sistema desarrollado por las Naciones Unidas, que consiste en los símbolos: tóxico, inflamable, nocivo y corrosivo. El otro sistema es norteamericano, el cual usa los colores: azul para riesgo en la salud, rojo para riesgo de inflamación, amarillo para riesgo de reacción y blanco para riesgo por contacto.

Desechos Químicos

De acuerdo a las normativas vigentes del servicio de salud ambiental, todo residuo industrial debe ser tratado debidamente antes de ser arrojado como efluente.

Normas de Seguridad en el Laboratorio

Durante la permanencia en el laboratorio, el alumno debe usar delantal blanco, abotonado y con los puños ajustados. Para trabajar en el laboratorio, el alumno debe usar zapatos cerrados y no sandalias. Todo alumno con pelo largo, deberá atarlo detrás de la nuca durante la sesión de laboratorio. Los pasillos del laboratorio deben permanecer despejados. Los mesones del laboratorio deben estar limpios y despejados, para trabajar en forma cómoda y segura. Antes de comenzar un experimento, debe leer cuidadosamente las instrucciones y estar seguro de comprender cada actividad y entender el funcionamiento de los equipos, así como las razones que justifican cada paso o etapa. No deben utilizarse utensilios rotos o trizados. Si durante la permanencia en el laboratorio se rompe algún material, esto se debe comunicar de inmediato al profesor. El laboratorio es un lugar de trabajo igual que un escritorio. Es fundamental que permanezca limpio, por lo tanto, no tire residuos al suelo y si se derrama algún líquido sobre los mesones o en el suelo, límpielo inmediatamente con toallas de papel. Al finalizar la sesión de laboratorio, debe dejar el lugar de trabajo ordenado, el material y los aparatos empleados limpios y en perfecto estado de uso. Al término de la sesión, controle que no queden llaves de agua o gas abiertas.

Conducta en el Laboratorio

El comportamiento en el laboratorio debe estar basado en el uso del sentido común y el buen juicio. Por ello, no se deben hacer bromas, correr, jugar, empujar, gritar. Durante la sesión de trabajo no debe ausentarse del laboratorio sin la autorización del profesor. Nunca se puede dejar un aparato o equipo funcionando sin vigilancia. Permanezca en su lugar de trabajo cuando esté realizando una experiencia. No se permite el uso de su celular en el laboratorio, este debe quedar apagado o en modo silencioso en su bolso.

Normas Higiénicas

En el laboratorio no se puede comer ni beber, ya que cabe la posibilidad de que los alimentos o las bebidas se contaminen con productos químicos. En el laboratorio no se puede fumar. Toda persona deberá lavarse siempre las manos después de hacer un experimento y antes de salir del laboratorio.

Uso de Materiales y Equipos

No utilice nunca un equipo o aparato sin conocer perfectamente su funcionamiento. En caso de duda, pregunte al profesor. Las balanzas deben permanecer limpias y descargadas. No se deben pesar productos químicos directamente sobre el plato de la balanza. No utilice material de vidrio en mal estado. Se debe evitar los golpes y cambios bruscos de temperatura en el material de vidrio. No se debe sacudir una probeta o cualquier otro objeto de vidrio para secarlos.

Manipulación de Productos Químicos

Los productos químicos pueden ser peligrosos por sus propiedades tóxicas, corrosivas, inflamables o explosivas. Por ello, todos los productos deben ser manipulados con mucho cuidado y estar concentrado en su lugar de trabajo. No se debe mirar por la boca de los tubos de ensayo o matraces, cuando se está realizando una reacción para evitar inhalar vapores tóxicos. No se debe oler ni inhalar ningún producto químico, especialmente cuando se manipulan productos tóxicos, irritantes, corrosivos o lacrimógenos. Para oler algún producto, no debe acercarse la cara al recipiente, sino que se arrastrará el vapor hacia la nariz pasando la mano por encima de él. No se debe llevar a la boca ningún compuesto químico. Utilizar siempre propipetas para llenar pipetas. Nunca pipetee con la boca, aunque sea agua, ya que la pipeta puede estar sucia con algún químico. No utilizar ningún producto de un recipiente que no esté debidamente etiquetado. Cuando los reactivos se contaminan, los experimentos se echan a perder y pueden ocurrir accidentes, por lo tanto, nunca devolver al frasco los restos de productos químicos no utilizados. Nunca introduzca en un frasco de reactivo los goteros o pipetas ya usadas. Pipetas o espátulas deben quedar al lado del frasco sobre una toalla de papel debidamente etiquetado. Todo frasco de reactivo, luego de ser usado, deberá permanecer tapado y en el lugar dispuesto por su profesor. No lo debe llevar a su mesón de trabajo. Se saca del frasco de reactivo sólo lo necesario, respetando siempre, rigurosamente, las instrucciones dadas al respecto por el profesor. La manipulación de productos sólidos se debe realizar con la ayuda de una espátula.

Eliminación de Residuos

Los residuos líquidos no deben arrojarse por el desagüe. Deposítelos en los recipientes dispuestos para tal fin. Los residuos sólidos deben botarse bien envueltos a los basureros, pero nunca en los desagües. El material de vidrio roto deberá ser depositado en los recipientes destinados para este fin.

Precauciones en el Laboratorio

Evite tener mecheros encendidos sin necesidad. Las llaves de agua y de gas se deben tener siempre cerradas, excepto cuando se están usando. En caso de fuego en el laboratorio, evacuar por las salidas señalizadas. Avisar a todos los compañeros, conserve la calma tratando que no se extienda el pánico. Comunicar inmediatamente al profesor en caso de algún accidente, quemadura o corte. Los productos químicos que se hayan vertido sobre la piel, han de ser lavados inmediatamente con agua corriente abundante durante 15 minutos, como mínimo. En caso de producirse lesiones por productos corrosivos en la piel por ácido, corte lo más rápidamente posible la ropa mojada por el producto químico. Lavar con agua corriente abundante la zona afectada. Neutralizar la acidez con bicarbonato sódico durante 15 a 20 minutos. En caso de producirse lesiones por productos corrosivos en la piel por álcalis, lavar la zona afectada con agua corriente abundante y aplique una disolución de ácido acético al 1%. En caso de producirse lesiones por productos corrosivos en los ojos, se debe reaccionar lo más rápido posible, en menos de 10 segundos. Lavar los ojos con agua corriente abundante durante 15 minutos como mínimo, empleando para ello un lavaojos de emergencia o, en su defecto, un frasco lavador.

Método Científico

El Método Científico es un procedimiento riguroso y sistemático orientado a extraer información verdadera de algún estudio.

Material de Laboratorio

Material de Vidrio

Durante el laboratorio, en muchas oportunidades es necesario medir con exactitud volúmenes de líquidos para la correcta ejecución del paso experimental. Para ello, existen diversos tipos de materiales volumétricos. Por lo tanto, es necesario conocerlos y tener claro cuál utilizar en cada ocasión. Cabe señalar que la precisión de la medida con estos materiales puede verse alterada. Considerando que la mayoría de los materiales volumétricos que se usan en el laboratorio están hechos en vidrio, y este material puede dilatar o contraerse según la temperatura a la que está expuesto, se ha establecido un estándar convencional de 20ºC para material de laboratorio destinado a medir volúmenes. La graduación de los utensilios considera un aforo para entregar volúmenes determinados. Para trabajar en el laboratorio es esencial tener un conocimiento básico del material de vidrio que se requiere y de su adecuado uso.

Vaso Precipitado

Se utiliza para contener un volumen de un líquido, disolver sustancias, evaporar líquidos por calentamiento y para realizar reacciones. Poseen graduación que indica su capacidad máxima y van comúnmente desde 25 mL hasta 2 L.

Matraz Erlenmeyer

Se utiliza para contener un volumen de un líquido. Es especialmente útil cuando se requiere tener un volumen de líquido en constante agitación. Por su forma, el líquido no salpica fuera del matraz. Los más comunes poseen una capacidad de volumen que fluctúan desde 25 mL hasta 1 L.

Probeta

Recipiente cilíndrico con escala graduada y provisto de una base. Se utiliza para medir volúmenes conocidos de un líquido y permite trasvasijarlo a otro recipiente por vaciado. Los más comunes poseen graduaciones que indican su capacidad máxima, con volúmenes de 5, 10, 25, 50, 100, 250 y hasta 2000 mL de capacidad. Se usa cuando no es necesaria una gran precisión en la medida del volumen. Debido a que su diámetro interior es amplio, las probetas sirven sólo para mediciones aproximadas de volúmenes.

Matraz Aforado

Material calibrado para preparar soluciones a volúmenes y concentraciones específicas. Estos matraces deben permanecer tapados, para evitar la evaporación del disolvente de la disolución y no se deben calentar, pues pierden su calibración. Hay matraces aforados con capacidad para contener con exactitud 25, 50, 100, 250, 300, 1000 y 2000 ml de líquido o solución.

Pipeta Graduada

Se utiliza para medir fracciones de un volumen conocido de líquido con una precisión aceptable, permitiendo transferir el líquido de un recipiente a otro. Tiene una escala graduada que permite medir volúmenes intermedios a su máxima capacidad. Existen pipetas de 1, 2, 5 y 10 mL, generalmente graduadas en décimas y centésimas del volumen que contienen.

Pipeta Aforada o Volumétrica

Existen pipetas de 1, 2, 5, 10, 25 y 50 mL de capacidad. Al igual que las pipetas graduadas, se utiliza para medir y transferir volúmenes fijos y exactos, no se pueden medir volúmenes intermedios al indicado en la pipeta. Para utilizarla correctamente, se debe llenar hasta la línea superior llamada aforo y vaciarla completamente. La cantidad de volumen medido en estas condiciones se llama alícuota. Se reconocen por presentar su parte central más dilatada.

Uso de las Pipetas

Así como todo material de vidrio destinado a la medición de volúmenes, deben ser previamente ambientadas con el líquido a medir. Esto consiste en hacer escurrir una pequeña porción del líquido por las paredes internas del instrumento, para luego desecharlo. Este proceso tiene como fin evitar toda alteración de la sustancia a medir, ya sea en su composición o concentración. La pipeta se llena por succión utilizando una pera de goma llamada propipeta o bien por acción capilar.

La propipeta tiene 3 válvulas:

• Válvula A: expulsión del aire.
• Válvula S: aspiración del líquido.
• Válvula E: vaciado del líquido.

Si la pipeta se ha llenado por capilaridad, se debe vaciar el líquido por acción de la gravedad, regulando la velocidad y cantidad de volumen vaciado haciendo presión con el dedo índice sobre el extremo superior de la misma. En ambos casos, el líquido vertido se deja escurrir sobre las paredes del recipiente que lo recibe.

Bureta

Tubo graduado provisto de una llave que permite controlar el flujo con que el líquido se evacua. Sirve para medir volúmenes conocidos y exactos. Otorga mediciones con precisión del orden de la centésima de mL (± 0,01 mL). La bureta está calibrada para verter una cantidad dada de líquido, aumentando la numeración desde la boca de la bureta hacia el extremo donde se encuentra la llave. Esta última puede ser de vidrio o de teflón. La bureta se utiliza en forma vertical sostenida por un soporte universal mediante una pinza llamada porta bureta.

Uso de la Bureta

Antes de realizar cada medición, se debe tener la precaución de eliminar totalmente las burbujas de aire que puedan quedar ocluidas entre la llave y el extremo de la bureta. Para ello, es aconsejable abrir la llave un instante con cuidado y verter, en un vaso precipitado de desechos, una pequeña porción de líquido hasta lograr expulsar el aire contenido. Además, el vaciado de la bureta debe ser lento, para que el líquido tenga el tiempo necesario para escurrir y la lectura sea correcta.

Medida y Lectura Correcta de Volúmenes con Probetas, Pipetas, Buretas y Matraces Aforados

Todos los líquidos (excepto el mercurio) mojan las paredes de los recipientes que los contienen, y como consecuencia de ello, su superficie no es plana y forman una curva a la que se le llama menisco. Para hacer una correcta lectura, se debe tomar la probeta, tubo graduado o matraz aforado, etc. con la mano y subirla hasta que el nivel del líquido (menisco) quede a la altura de nuestros ojos, de tal forma que la medida se tome en la tangente del menisco. Una causa de error en la medida de volúmenes es debida a que no se sitúa la altura del nivel del líquido a la altura de los ojos. Este error recibe el nombre de error de paralelaje o paralaje. La otra causa de error se debe a que, aunque se sitúe el nivel del líquido a la altura de nuestros ojos, no hacemos la lectura en la tangente del menisco. Este error se llama error de nivel.

Pizeta

Es un frasco de polietileno que suministra pequeñas cantidades de líquidos, que ayudan a arrastrar sólidos desde las paredes de un contenedor, o bien, para lavar precipitados, entre otras.

Micropipetas

Las micropipetas están diseñadas para medir pequeños volúmenes de líquido con una alta precisión.

Medición de Volúmenes

La unidad básica de volumen según el Sistema Internacional (SI) es el m³. Dada la pequeña envergadura de las operaciones que se realizan en el laboratorio, los volúmenes se miden, generalmente en mL. Otra unidad de volumen común, pero que no pertenece al SI es el litro (L). Otras unidades de volumen son: decilitro (dL), microlitro (µL), picolitro (pL).

La interconversión de unidades es la siguiente:

1 L = 1000 mL 1 mL = 1 cm³

1 dL = 10 mL 1 µL = 1×10^-6 L

Balanza de Laboratorio

La unidad internacionalmente reconocida como patrón de peso es el kilogramo (Kg). Sin embargo, en el laboratorio la unidad de peso más usada es el gramo (g), así como el miligramo (mg) y el microgramo (µg) que son submúltiplos del gramo.

Balanza de Precisión

Se caracteriza por un sistema oscilante de una barra o cruz apoyada sobre una columna. Actualmente a este tipo de balanza se le ha adicionado un sistema electrónico que registra la pesada. La capacidad de carga de las balanzas de precisión es generalmente hasta 500g y más comúnmente hasta 200g, con una exactitud de pesada al centésimo de gramo.

Balanza Analítica

Es un instrumento de alta precisión empleada en la pesada de reactivos del orden de los miligramos. Las balanzas analíticas pueden presentar un variado tipo de diseños y aspectos exteriores, todas ellas se construyen basadas en los mismos principios. La base es de gran solidez y confiere estabilidad al instrumento evitando al máximo la posibilidad de vibraciones. La columna es un tubo por el cual se conduce el mando de arresto o bloqueo del sistema oscilante. La cruz está hecha de una aleación especial de aluminio u otro metal estable que no permita deformaciones por el peso variable que debe soportar.

Aplicación de Calor

Mechero Bunsen

La aplicación de calor sobre muestras se usa con el fin de acelerar reacciones químicas, esterilizar, secar, calcinar, etc. Para ello se emplean materiales resistentes al calor tales como tubos de ensayo, matraces erlenmeyer, crisoles, vasos de precipitado, etc. La principal fuente de calor utilizada en el laboratorio es el mechero Bunsen.

Densidad

La densidad de un cuerpo es la masa que tiene la unidad de volumen de ese cuerpo, a una temperatura determinada.

La unidad del sistema internacional, SI para la densidad es kilogramo por metro cúbico (kg/m³). Esta unidad es demasiado grande para la mayoría de las aplicaciones, por eso es frecuente expresar la densidad en unidades de g/cm³, g/mL o kg/L.

Interconversión de unidades: 1000 kg/m³ = 1 g/mL = 1 g/cm³

Los densímetros o areómetros consisten en cilindros de vidrio hueco que, en su parte inferior contienen un lastre (municiones, perdigones, o mercurio) y en su parte superior están unidos a un tubo que contiene una escala graduada. La densidad varía con la temperatura, es por lo que una vez que se haya medido la densidad, hemos de medir también la temperatura a la que se ha realizado la medición y luego ver en las tablas la corrección.

Notación Científica

En el trabajo científico es muy común encontrarse con números muy grandes o demasiado pequeños, por lo que, para trabajar con este tipo de cantidades, se utiliza la notación científica, según la cual todos los números se pueden expresar como:

N x 10ⁿ

Donde N es un número entre 1 y 10 y n es un exponente entero, que puede ser positivo o negativo.

Ejemplos:

Cuando se analizan mediciones, es conveniente tener muy clara la diferencia existente entre dos términos muy usados en este ámbito: precisión y exactitud.

La exactitud indica cuán cerca está una medición del valor real de una cantidad medida. Por lo tanto, dice relación con el error de una medición.

La precisión indica cuánto concuerdan dos o más mediciones experimentales realizadas en condiciones idénticas. Por lo tanto, dice relación con la incerteza, la precisión, o la desviación de los datos obtenidos.

Reproducibilidad: Es otro término para describir precisión. Es una forma de determinar que un procedimiento dado, al repetirlo, permite obtener resultados iguales o muy cercanos entre sí.

Mezclas y Disoluciones

Una mezcla es una combinación de dos o más sustancias en la cual éstas mantienen su identidad. Se pueden separar sus componentes puros por medios físicos sin cambiar su identidad.

Tipos de Mezclas

• Mezcla Homogénea: La composición de la mezcla es la misma en toda la solución y son indistinguibles sus componentes.
• Mezcla Heterogénea: Los componentes individuales permanecen físicamente separados y se pueden ver como tales.

Proceso de Disolución

La solución se define como una mezcla homogénea de sustancias puras en la cual no hay precipitación. Las soluciones verdaderas constan de un disolvente y uno o más solutos, cuyas proporciones varían de una a otra solución. El disolvente es el medio en el cual los solutos se disuelven. Las unidades fundamentales de los solutos son los iones o moléculas.

Miscibilidad

La miscibilidad es la capacidad de un líquido para disolverse en otro. Las tres atracciones que están involucradas en la miscibilidad son: soluto-soluto; disolvente-disolvente; soluto-disolvente.

Hidrofobicidad

El soluto no tiene afinidad con el agua como disolvente, pero sí por solventes apolares.

Hidrofilicidad

El soluto tiene afinidad con el agua como disolvente y no por los disolventes apolares.

Tipos de Disolución Homogénea (Disolución de Líquidos en Líquidos)

Todos los líquidos polares son solubles en la mayoría de los disolventes polares. Los líquidos apolares que no reaccionan con el disolvente generalmente no son muy solubles en líquidos polares, ya que las fuerzas de interacción son desiguales. Sin embargo, los líquidos no polares suelen ser bastantes solubles en otros líquidos no polares.

Tipos de Mezclas Heterogéneas

• Dispersión coloidal: Consiste en partículas finamente divididas suspendidas en un medio continuo. Las partículas constituyen la fase dispersa o coloide y el medio es el dispersante.
• Emulsión: Coloide constituido por dos fases, una de estas fases es acuosa y la otra es un aceite. Por ejemplo, mayonesa y mantequilla.
• Suspensión: Coloide constituido por dos fases, una de estas fases puede ser líquida y la otra sólida. Por ejemplo, arena en agua.

Unidades de Concentración

• Gramos por Litro (g/L): Gramos de soluto por litro de disolución.
• Miligramos por Decilitro (mg/dL): Miligramos de soluto por decilitro de disolución.
• Porcentaje peso/peso (%p/p): Gramos de soluto en 100 gramos de disolución.
• Porcentaje peso/volumen (%p/v): Gramos de soluto en 100 mL de disolución.
• Porcentaje volumen/volumen (%v/v): Mililitros (mL) de soluto en 100 mL de disolución.
• Molaridad (M): Moles de soluto en 1000mL o 1 Litro de disolución.
• Molalidad (m): Moles de soluto en 1000 g de disolvente.
• Normalidad (N): Número de equivalentes de soluto en 1000 mL de disolución.
• Fracción Molar ( ): Número de moles del soluto A en moles totales.

Espectrofotometría

El parámetro denominado transmitancia, T, se define como la razón entre la intensidad de luz que emerge y la que incide en la muestra. Por lo tanto, la transmitancia es una fracción menor o igual a uno y también se puede expresar como porcentaje, con lo cual, el %T varía entre 0 y 100. Sin embargo, la transmitancia no varía linealmente con la concentración, sino a través de una función logarítmica.

Factores que Afectan la Absorbancia

• Concentración, C: La relación entre absorbancia y concentración es lineal. La concentración se expresa en concentración Molar.
• Camino óptico, b: El camino óptico, es decir, la distancia que debe recorrer el haz que atraviesa la muestra, el cual está dado por el ancho de la celda. La absorbancia varía linealmente con este parámetro que se simboliza también por «l». Se expresa en cm.
• Coeficiente de extinción molar, ε: Es una constante cuyo valor indica la probabilidad de una transición electrónica. Esta constante es, por lo tanto, inherente a cada especie, debido a que la absorción dependerá de la facilidad con que se efectúen las transiciones electrónicas y vibracionales posibles en una determinada molécula, a una longitud de onda determinada, en un disolvente determinado.

Determinación de Concentración a través de la Curva de Calibración

En numerosas disciplinas (Química, Medicina, Biología, Agronomía, etc.), se
requiere determinar concentraciones en muestras que contienen especies
capaces de absorber luz y cuyas concentraciones son desconocidas. Basándose
en la ley de Lambert-Beer, es posible determinar sus concentraciones a través del
uso de una curva de calibración.
Por lo tanto, una curva de calibración grafica las absorbancia en función de la
concentraciones, de una serie de soluciones patrón (diferentes concentraciones
conocidas) a las cuales se les ha determinado su absorbancia a ëfija, Se grafica
Absorbancia (A) versus Concentración (C), trazando la mejor recta, que nace
desde el origen (0,0).

La curva de calibración, es el método más apropiado de análisis, ya que está
basado en relaciones lineales entre la propiedad medida y la variable a
determinar.
La recta debe pasar por cero, es decir, la absorbancia de una disolución cuya
concentración en la especie analizada es cero, debe ser cero. En este aspecto se

basa la calibración del instrumento: se ajusta el cero con una disolución que
contiene todos los componentes de la muestra, excepto el que se desea
determinar: disolución blanco. Es decir, al medir las absorbancia de las soluciones
patrón y de la muestra de concentración desconocida, a cada una de estas
absorbancia (AE) debe restarse la absorbancia de la solución blanco (AB), el
resultado de esta resta corresponde a la absorbancia real de la muestra (AR).